Поиск Кабинет

Влияние длительности сокультивирования клеток из пуповинной крови и стромально-васкулярной фракции жировой ткани на амплификацию гемопоэтических предшественников

Гены & Клетки: Том XI, №1, 2016 год, стр.: 48-53

 

Авторы

Андреева Е.Р., Андрианова И.В., Горностаева А.Н., Бобылева П.И., Балашова Е.E., Буравкова Л.Б.

ДЛЯ ТОГО ЧТОБЫ СКАЧАТЬ СТАТЬЮ В ФОРМАТЕ PDF ВАМ НЕОБХОДИМО АВТОРИЗОВАТЬСЯ, ЛИБО ЗАРЕГИСТРИРОВАТЬСЯ

Пуповинная кровь (ПК) представляет собой полноценный источник гемопоэтических стволовых и прогениторных клеток (ГСПК), количество которых может быть дополнительно увеличено ex vivo. Оптимизация условий экспансии является необходимым этапом исследований in vitro. Ранее мы показали, что за счет прикрепления части ядросодержащих клеток из ПК к мультипотентным мезенхимальным стромальным клеткам (МСК) из жировой ткани и последующей экспансии прикрепившихся малодифференцированных клеток можно получить популяцию, обогащенную ГСПК. Цель настоящей работы – оптимизация предложенного протокола. После кратковременного (1–3 ч.) и длительного (24–72 ч.) со-культивирования ядросодержащих клеток ПК с МСК из жировой ткани все неприкрепившиеся клетки удаляли, а адгезировавшиеся ГСПК продолжали культивировать в течение 72 ч., что приводило к формированию новой популяции суспензионных клеток. Определено количество прикрепившихся ГСПК на разных сроках со-культивирования, а также число ГСПК, КОЕ и доля CD34+-клеток в популяции суспензионных ГСПК после 72 ч. экспансии адгезированных ГСПК. После 72 ч. адгезии ядросодержащих клеток ПК число адгезированных СD34+-клеток было максимальным и составляло более 70% от всех СD34+-клеток в исходной популяции. По сравнению с исходными мононуклеарами ПК в результате экспансии в нашей модельной системе происходило увеличение количества примитивных CD34+ предшественников среди ГСПК в 4 раза, КОЕ – в 6 раз. Вне зависимости от времени адгезии исходных ядросодержащих клеток ПК, БОЕ-Э составляли 80-90% от всех КОЕ среди ГСПК. Таким образом, со-культивирование ядросодержащих клеток ПК с МСК из жировой ткани в течение 3 сут. обеспечивает максимальную адгезию CD34+-клеток, которые при последующей амплификации дают популяцию, существенно обогащенную как недифференцированными, так и коммитированными гемопоэтическими предшественниками.

Подняться вверх сайта