Поиск Кабинет

Эритропоэтин-опосредованная активация функциональных свойств мононуклеаров периферической крови у больных с хронической сердечной недостаточностью

Гены & Клетки: Том XII, №2, 2017 год, стр.: 82-87

Авторы

Повещенко О.В., Бондаренко Н.А., Ким И.И., Лыков А.П., Суровцева М.А., Покушалов Е.А., Романов А.Б., Повещенко А.Ф., Коненков В.И., Караськов А.М.

DOI: 10.23868/201707019

Терапия различными видами стволовых и прогениторных клеток заболеваний сердечно-сосудистой системы, таких как инфаркт миокарда, является перспективным методом для стимуляции репарации ишемизированной ткани.
Один из основных механизмов действия вводимых клеток является паракринный. Цель работы – оценить влияние эритропоэтина на функциональную активность мононуклеарных клеток (МНК) больных хронической сердечной недостаточностью до и после обогащения периферической крови стволовыми и прогениторными клетками, мобилизированными гранулоцитарным колониестимулирующим фактором (Г-КСФ).
Исследование проведено с участием 48 пациентов с ишемической болезнью сердца. МНК из сепарированной крови выделяли на градиенте плотности фиколла/верографина. Фенотип эндотелиальных прогениторных клеток
исследовали с использованием моноклональных антителк CD34, CD133, VEGFR2, CD31. Изменение пролиферативного потенциала МНК в ответ на эритропоэтин определяли в МТТ-тесте. Уровень продукции цитокинов изучали в кондиционированных средах с помощью твердофазного иммуноферментного анализа. Эффективность интрамиокардиального введения мобилизованных МНК оценивали через 6 и 12 мес. по изменению функционального класса сердечной недостаточности по NYHA, объему фракции выброса левого желудочка сердца и изменению перфузии миокарда. Показано, что обогащение периферической крови путем мобилизации стволовых и прогениторных клеток у больных с хронической сердечной недостаточностью приводило к активации пролиферативного потенциала МНК и увеличению продукции эритропоэтина, обладающего проангиогенной активностью. Обогащенные МНК при культивировании их с эритропоэтином увеличивали уровни продукции TNF-α, IL-10, IL-18, IL-8, Г-КСФ и VEGF по сравнению с базальным уровнем продукции. Количество циркулирующих эндотелиальных прогениторных клеток с фенотипом CD34–/VEGFR2+ коррелировало с уровнем продукции эритропоэтина. Секреторный уровень эритропоэтина находился в прямой связи с перфузией миокарда, фракцией выброса левого желудочка и с классом сердечной недостаточности через 6 и 12 мес. наблюдения. Полученные данные свидетельствуют о том, что эритропоэтин улучшает функциональные свойства МНК больных с хронической сердечной недостаточностью после мобилизации стволовых и прогениторных клеток с помощью Г-КСФ.

Ключевые слова: эритропоэтин, стволовые и прогениторные клетки, хроническая сердечная недостаточность, гранулоцитарный колоние-стимулирующий фактор.

 

Erythropoietin-mediated activation of functional properties of peripheral blood mononuclear cells in patients with chronic heart failure

Stem cell therapy of diseases of the cardiovascular system, such as myocardial infarction is a prospective method for the stimulation of ischemic tissue repair. The main mechanisms of stem and progenitor cells action is a paracrine.
The purpose of the study was to assess the effects of erythropoietin on the functional activity of mononuclear cells (MNCs) in patients with chronic heart failure before and after enrichment of peripheral blood with stem and progenitor
cells mobilized by granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF). 48 patients with coronary heart disease participated in the study.
MNCs from the separated blood were isolated by density gradient on Ficoll/verografin. The phenotype of endothelial progenitor cells was investigated using monoclonal antibodies to CD34, CD133, VEGFR2, CD31. The Change of MNCs proliferative potential in response to erythropoietin was evaluated by MTT-test. The cytokine production in conditioned media was studied using ELISA. The effectiveness of mobilized MNC intramyocardial administration was assessed at 6 and 12 months by detection of a change in functional class according to NYHA heart failure, volume ejection fraction of the left ventricle of the heart and a change in myocardial perfusion. We showed that the enrichment of peripheral blood by mobilization of stem and progenitor cells in patients with chronic heart failure led to activation of proliferative potential of MNCs and increased erythropoietin production, a cytokine with pro-angiogenic activity. MNC enriched with stem and progenitor cells being culturing with erythropoietin increased the levels of TNF-α, IL-10, IL-18, IL-8, G-CSF and VEGF, as compared with the basal level of production. Circulating endothelial progenitor cells with the phenotype CD34- /VEGFR2 + have a correlation with the level of erythropoietin production. Secretory erythropoietin level directly correlated with myocardial perfusion, left ventricular ejection fraction and heart failure class at 6 and 12 months follow-up. The findings suggest that erythropoietin improves functional properties of the MNC of patients with heart failure after mobilization with G-CSF.

Keywords: erythropoietin, stem and progenitor cells, chronic heart failure, granulocyte colony-stimulating factor.

 

 

Подняться вверх сайта